辛柏青生在河北,长在北京。他在学生时代曾经练过几年跳高,一直梦想着成为一名专业的运动员,但由于身高很难到一米九,在高中时被教练劝退。失去了目标的辛柏青,最终听从建议选择学习表演。1993年,辛柏青考入中央戏剧学院表演系。
话剧1995年,参演首部电视剧《走进阳光》,饰演一名乐队键盘手。1997年,参演小剧场话剧《俺爹我爸》,之后进入中央实验话剧院。1999年,主演电视剧《致命邂逅》,在剧中饰演为谋求利益不择手段的章迈。2000年,在何群执导的为国际志愿者年创作的电影《因为有爱》中饰演一名青年志愿者。2001年,参演林兆华导演的改编自莎士比亚戏剧的话剧《理查三世》；4月,主演田沁鑫导演的讲述戏剧家田汉情感及创作历程的话剧《狂飙》,该剧以五场戏中戏为串连,展现了田汉浪漫而充满革命情怀的一生；同年,在田壮壮执导的电影《小城之春》中饰演章志忱。电视剧2002年,主演电视剧《救赎》,在剧中饰演果敢硬朗且正直善良的狱警方周,该剧以鲜为人知的狱警视角描写了狱警与犯人之间的心理较量。2005年,主演电视剧《幸福像花儿一样》,在剧中饰演错失爱情的战斗英雄林彬；同年,主演古装剧《嘉庆皇帝》,在剧中饰演励精图治但因性格和能力注定平庸的嘉庆帝永琰。2006年,主演电影《红色满洲里》,在影片中饰演一名胆小懦弱但不断成长的地下交通员。影片2007年,主演的谍战剧《雪狼》播出,在剧中饰演于良知和情感之间纠结挣扎的外科医生刘栋梁；同年,主演话剧《红玫瑰与白玫瑰》,在剧中饰演佟振保,并凭借此角获得国家艺术院团优秀剧目展演优秀表演奖。2008年,主演的抗战剧《中国兄弟连》播出,在剧中饰演儒雅的国民党连长袁学勇；同年,主演的电影《胡同里的阳光》上映,在影片中饰演一名不断受挫但积极谋生的父亲。2010年,主演电视剧《老马家的幸福往事》,在剧中饰演刚正不阿的官员马鸣；同年,与朱媛媛在都市轻喜剧《幸福密码》中饰演一对欢喜冤家；10月,主演的话剧《四世同堂》在台北孙中山纪念馆首演,在剧中饰演为升官发财而不惜当汉奸的反面角色冠晓荷,并凭借该角色获得第八届全国戏剧文化奖话剧金狮奖表演奖及第十届中国艺术节优秀表演奖。2011年2月,在播出的你好春天2011年文化部春节电视晚会中演绎改编自曹禺话剧的三个片段,饰演焦大星,周萍,方达生三个角色；同年,主演建党90周年献礼电影《情归陶然亭》,在影片中饰演英年早逝的革命先驱高君宇。2013年3月,主演的话剧《青蛇》在香港首演,在剧中饰演不同于以往形象的慈悲为怀的高僧法海,并凭借该角色第三届戏剧表演学院奖最佳主角奖；同年,在老师高景文执导的电视剧《长白川》中饰演心狠手辣的反派黄漂；7月,主演的电视剧《我的父亲母亲》播出,在剧中饰演因报恩而拥有特殊婚姻的下乡知青陈志。2015年,与朱媛媛,李雪健主演的改编自小说《一句顶一万句》的电视剧《为了一句话》播出,在剧中饰演名为“百顺”但事事不顺的杨百顺。纪录片2016年12月,主演的话剧《谷文昌》在国家话剧院首演,在随后的竞演中,凭借饰演的“谷文昌”一角获得2018年上海静安现代戏剧谷“壹戏剧大赏”年度最佳男演员,第29届中国戏剧梅花奖,第30届上海白玉兰戏剧表演艺术奖主角奖等奖项。2018年,参演的电视剧《美好生活》播出,在剧中饰演落魄但乐观向上的心理医生边志军。2019年,参演电影《我和我的祖国》；9月,参与庆祝中华人民共和国成立70周年文艺晚会《奋斗吧中华儿女》演出；11月,凭借在陈凯歌执导的电影《妖猫传》中饰演的李白,获得第32届中国电影金鸡奖最佳男配角提名；12月,参演的节目《故事里的中国第一季》播出；同月,入选2019年文化名家暨“四个一批”人才拟入选人选名单。2020年,主演五集纪录片《王阳明》并担任该片解说；8月,参演的电影《八佰》上映,在影片中饰演记者方兴文；12月,参演的古装剧《大秦赋》播出,在剧中饰演秦庄襄王嬴异人。综艺舞台剧2021年1月,以“国宝守护人”身份参加的《国家宝藏第三季》播出,在其中饰演敦煌研究院首任院长常书鸿；3月,参与创排话剧《英雄时代》,饰演不畏牺牲的排爆特警孟平,该剧以中国国家话剧院CNT现场首部“戏剧电影”形式上映；同年,在《典籍里的中国》中再次饰演王阳明,以舞台剧的形式叙述王阳明“知行合一”的思想宗旨。2022年1月,主演的电视剧《人世间》首播,在剧中饰演周家长子周秉义,以近五十年的跨度展现了大公无私,鞠躬尽瘁的一类干部形象；4月,主演由徐童执导的电影《三个十年》；9月,文献话剧《抗战中的文艺》建组,在剧中影像出演冼星海；11月,凭借由张律执导的电影《漫长的告白》获得第35届中国电影金鸡奖最佳男配角奖。2023年1月,与张律再次合作的的电影《白塔之光》入围第73届柏林国际电影节主竞赛单元；4月,凭借《白塔之光》获得第13届北京国际电影节天坛奖最佳男主角奖。9月,参演的由陈凯歌执导的电影《志愿军：雄兵出击》上映,在片中饰演志愿军司令部高级参谋李默尹。
辛柏青和妻子朱媛媛是大学同学,2006年5月26日,两人登记结婚。2008年8月,他们的女儿出生。日常生活杂志写真综艺活动
2003年12月,与朱媛媛参加中国青年志愿者行动十年庆典晚会。2004年8月,与朱媛媛随《真情北京》特别栏目《远离故土的五星红旗》摄制组前往斐济等国家为中国驻外使馆人员举办慰问演出。2008年5月,参与录制《光荣绽放》的赈灾特别节目《大爱无疆》；7月,参与录制抗震歌曲《最好的礼物》。2011年5月,与朱媛媛参加关注乳腺健康的2011“赛特粉红春天健步行”大型公益活动；6月,参与录制公安部消防局组织的消防安全宣传公益广告；9月,与陈数担任“国话之秋”演出季代言人。2013年1月,参加关注贫困留守儿童的基金公益盛典,并被授予“爱心志愿者”称号；同月,当选文化部青年联合会第三届委员会常委。2014年12月,代表中华少年儿童慈善救助基金会向北京市某幼儿园捐赠图书,并被聘为“回家的希望项目爱心大使”。2015年3月,前往贵州省六盘水市,向打拐被解救儿童发放救助金；4月,参与录制的公益电影《有一天》无障碍版发布；6月,前往甘肃省天水市,为留守儿童准备营养午餐。2016年4月,出席首台反拐题材儿童剧《回家的希望》发布活动。2017年9月,与陶虹主演公益微电影《第十七次抛弃》,担任“光照星未来”公益项目的形象大使,并各自资助了一名自闭症儿童一年的康复训练课程。2019年4月,在第29届中国戏剧梅花奖获奖演员走进广西民族大学开展慰问演出中担任主持人；6月,主持第十二届中国艺术节闭幕式晚会；11月,与朱媛媛参加北京海鹰脊柱健康公益基金会“生命之脊”诗歌音乐朗诵会；同月,参加第十五届深圳警营开放日活动,并获聘深圳警民关系代言人；12月,参加2020年元旦春节期间“我们的中国梦”——文化进万家活动启动仪式暨首场慰问演出。2020年12月,当选中国戏剧家协会第九届理事会理事。2021年8月,作为艺术家代表出席文化和旅游部召开的加强文艺工作者教育管理和道德建设工作座谈会并发言。
辛柏青肯埋头苦练,悟性高,虽然性格内向,但他一旦进入角色就会表现出对表演的天生热爱；他气质干净,形象清俊,身段漂亮,有从善如流的修养,非常有潜质和可塑造性,可亦正亦邪,作为演员用功且纯粹；他是我试戏了的这么多演员中,感觉最舒服的一个；辛柏青吃得很深,吐的很少,他有一些细微的动作设计,真懂表演的行家才能看出来；辛柏青是一个不急的人,他身上的温良恭俭让,潜移默化融入了自己的表演。无论是在生活还是在影视剧中,辛柏青多以正面形象示人,并被冠以“好好先生”的称号；然而他在话剧《四世同堂》中出演的“冠晓荷”却让观众感到“怒不可遏”,从眼角眉梢到走路说话,入木三分地演出了一个不得势的“汉奸”的猥琐与狼狈；他在《人世间》的演技征服观众,台词感染力十足,从《四世同堂》的冠晓荷到《妖猫传》中的李白,再到《人世间》的大哥周秉义,实力派演员辛柏青的演技逐渐得到了更广泛的认可。